При определении чувствительности использовались противоопухолевые препараты, принадлежащие к разным химическим группам, антибиотики и винкоалколоиды.
В таблице ниже представлены концентрации их, принятые нами за оценочные.
Оценочные дозы различных химиопрепаратов
| Препарат | Оценочная доза, мкг/мл |
| Винкристин | 0,62 |
| Винбластин | 0,62 |
| Актиномицин Д | 0,1 |
| Митрамицин | 0,17 |
| Оливомицин | 0,9 |
| Циклофосфан | 20,0 |
| Брунеомицин | 0,1 |
| Рубомицин С | 2,5 |
Получены эти концентрации, в основном, путем пересчета клинической дозы на 1 мл крови. Для некоторых препаратов использованы данные литературы о всасывании и распределении их в крови и органах людей после введения однократной клинической дозы.
Препарат считался активным в отношении опухоли, если он вызывал в указанной оценочной концентрации после 24-часового контакта при 37° необратимые патологические изменения более чем у 50% клеток эксплантата. В зависимости от установленной действующей концентрации опухоли распределились на нечувствительные, умеренно чувствительные и очень чувствительные. Оценка действия препаратов проводилась по морфологическим тестам после окраски гематоксилин-эозином по Гомори.
При исследовании контрольных препаратов 6—14-су-точной культуры симпатобластом и ганглионейробластом выявлялась характерная картина. В препаратах находилось большое количество клеток, образующих пласты и симпласты или лежащих отдельно в виде характерных фигур, имеющих вид колец или тяжа с веерообразно расположенными клетками (смотрите рисунок ниже).
Большое количество клеток, расположенных в виде пласта
или веера из контрольной культуры симпатобластомы
Окраска гематоксилином по ГомориХ300.
Иногда они имели вид звезд. Преобладали крупные и средней величины клетки с широкой зоной цитоплазмы, в которой часто выявлялась голубоватая зернистость, особенно в крупных клетках.
От цитоплазмы отходил один толстый, наиболее длинный и несколько тонких, более коротких отростков. Ядра имели овальную форму с нежной хроматиновой зернистостью и довольно крупные ядрышки (от одного до пяти). Эти клетки сходны со зрелыми ганглиозными клетками. Среди этих клеток нередко встречались двуядерные (смотрите рисунок ниже).
Двуядерная клетка в контрольной культуре симпатобластомы
Окраска гематоксилином по ГомориХ600.
В цитоплазме иногда наблюдалась мелкокапельная вакуолизация (смотрите рисунок ниже).
Вакуолизация цитоплазмы клеток в контрольной культуре
симпатобластомы; хорошо видны ядрышки
Окраска гематоксилином по Гомори Х 1200.
В гораздо меньшем количестве в препаратах присутствовали мелкие клетки с темным ядром, в котором не удавалось различить ядрышко, с узкой зоной еле заметной темной цитоплазмы и несколькими тонкими длинными отростками (смотрите первый рисунок).
Еще меньше было клеток несколько крупнее предыдущих, с темным гиперхромным ядром, узкой цитоплазмой и короткими отростками,сходных с незрелыми нервными клетками (смотрите первый рисунок). Наконец, встречались такого же размера клетки с темным гиперхромным ядром и едва различимой цитоплазмой без отростков, сходные с симпатобластами (смотрите рисунок ниже).
Мелкие безотростчатые клетки, сходные с симпатобластами
в контрольной культуре симпатобластомы
Окраска гематоксилином по Гомори Х 1200.
«Лекарственное лечение новообразований у детей», Л.А.Дурнов