Люминесцентная микроскопия (Посев обработанного материала)

Главная / Туберкулёз у детей и подростков / Обследование ребенка, больного туберкулезом / Люминесцентная микроскопия (Посев обработанного материала)

Посев обработанного материала производят в 3 или 6 пробирок с различными питательными средами, чаще используют плотные яичные среды Левенштейна — Иенсена, Петраньяни, Гельбера.

Применяют также безаспарагиновую среду № 2 и «Новую». Для ускорения роста микобактерии ведутся разработки полужидких сред. В качестве стандартной среды Всемирной организацией здравоохранения рекомендована среда Левенштейна — Пенсена, которая обладает высокой чувствительностью. Размножение микобактерии и образование колоний происходит медленно, заметный для глаза рост колоний появляется через 2 … 4 нед, а часто лишь через 2 … 3 мес, поэтому посевы длительно выдерживают в термостате при температуре 37 … 38 °С.

Для ммкобактерий туберкулеза человеческого и бычьего вида характерно образование плотных морщинистых колоний кремового цвета. Выросшую культуру микроскопируют и дифференцируют по ряду признаков. На среде с натрия салицилатом не растут М. tuberculosis и М. bovis, другие микобактерии дают пышный рост. Положительный ниациновый тест отличает М. tuberculosis от М. bovis.

Для определения других видов микобактерии изучают скорость их роста на яичных и агаровых средах, образование пигмента, рост при разных температурах и применяют различные биохимические тесты.

Приобретает большое значение количественная оценка обсемененности исследуемого материала, что позволяет оценить тяжесть процесса, его прогноз и выбор метода лечения. Она производится при сопоставлении данных бактериоскопического метода и выделения культуры микобактерии.

Для этого интенсивность роста микобактерии на питательных средах оценивают по 4-балльной системе: «+» — меньше 20 колоний, « + + » — 20 … 50 колоний, « + + + » — более 50 колоний, « + + + + » — сплошной рост.

При проведении обычного бактериологического исследования не удается выявление L-форм микобактерии туберкулеза, поэтому разработан специальный метод их выделения. Параллельно с высевом на яичные среды после предварительной обработки материала производят посев осадка в 3 … 5 пробирках с полужидкой агаровой смесью (на основе среды Школьниковой), содержащей 20 %  сахарозы,  10 %  сыворотки крупного рогатого скота и

100 ЕД/мл пенициллина или стрептомицина для подавления неспецифической микрофлоры. Через 1 … 2 мес приготавливают препараты с применением фазово-контрастной микроскопии, L-формы удается выделить почти в 20 % случаев.

При проведении бактериологического исследования частота получения культур микобактерии туберкулеза от больных детей во многом зависит от фазы туберкулезного процесса. Так, по данным некоторых авторов, в фазе распада у детей и подростков, больных туберкулезом легких, частота выделения микобактерии в доантибактериальном периоде составляла 46 … 68 %, в фазе инфильтрации — 13 … 16 % и в фазе рассасывания — 4 … 8 %.

Применение антибактериальной терапии
привело к снижению высеваемости микобактерии (14 против 46 %). У детей раннего возраста при активном туберкулезе частота обнаружения микобактерии составляет лишь 10 %. Несколько выше результаты при исследовании промывных вод бронхов. Отмечены значительная высеваемость от больных детей атипичных, пигментных микобактерии и увеличение их выделения в процессе лечения больных.

«Туберкулёз у детей и подростков», Е.Н. Янченко

В реакции определяется присутствие в сыворотке крови больных туберкулезом комплементсвязывающих антипротеиновых антител. В качестве антигена используется сухой туберкулин производственных серий, препарат взвешивают и разводят изотоническим раствором NaCl. Инактивированную сыворотку больного разводят от 1:2,5 до 1:160 в объеме 0,5 мл. В каждую пробирку добавляют по 0,5 мл туберкулина в разведении 1:10 и 0,5 мл комплемента (рабочую…

В ответ на введение туберкулина в организме больных туберкулезом могут развиваться уколочные, общие и очаговые реакции. Уколочная реакция характеризуется возникновением на месте введения туберкулина папулы (инфильтрата) и гиперемии. При гиперергических реакциях возможно образование везикул, булл, лимфангита, некроза. Гистологически в этом месте на первых этапах отмечаются расширение капилляров, выпотевание тканевой жидкости, скопление нейтрофилов. В последующем появляется…

Для определения правильности укладки следует пользоваться следующим приемом: сравнить состояние ключиц или переднего конца костной части второй пары ребер с обеих сторон от срединной линии, проходящей через остистые отростки тел грудных позвонков. Наличие разницы между измерениями обеих сторон указывает на асимметричность снимка.При отсутствии патологических изменений асимметричность объясняется неправильностью укладки, т. е. поворотом пациента вправо или…

Этим методом обнаруживают микобактерии на 8 … 17 % чаще. Он основан на способности липидов микобактерии туберкулеза окрашиваться флюорохромами, которые светятся под действием коротких синих или ультрафиолетовых лучей. Этот метод более эффективен при предварительном обогащении материала флотацией или при гомогенизации. В качестве флюорохрома-красителя применяют смесь аурами на 00 и родамина С, при этом микобактерии флюоресцируют…

Интенсивность туберкулиновой реакции определяется степенью специфической сенсибилизации организма, его реактивностью и многими другими факторами, усиливающими или, наоборот, ослабляющими специфическую аллергию. У практически здоровых детей, инфицированных микобактериями туберкулеза, обычно туберкулиновая аллергия менее выражена, чем у больных с активными формами процесса. У детей с активным туберкулезом чувствительность к туберкулину в целом выше, чем у взрослых. При тяжелых…

Популярное
Новое Прочее