Люминесцентная микроскопия (Посев обработанного материала)

Главная / Туберкулёз у детей и подростков / Обследование ребенка, больного туберкулезом / Люминесцентная микроскопия (Посев обработанного материала)

Посев обработанного материала производят в 3 или 6 пробирок с различными питательными средами, чаще используют плотные яичные среды Левенштейна — Иенсена, Петраньяни, Гельбера.

Применяют также безаспарагиновую среду № 2 и «Новую». Для ускорения роста микобактерии ведутся разработки полужидких сред. В качестве стандартной среды Всемирной организацией здравоохранения рекомендована среда Левенштейна — Пенсена, которая обладает высокой чувствительностью. Размножение микобактерии и образование колоний происходит медленно, заметный для глаза рост колоний появляется через 2 … 4 нед, а часто лишь через 2 … 3 мес, поэтому посевы длительно выдерживают в термостате при температуре 37 … 38 °С.

Для ммкобактерий туберкулеза человеческого и бычьего вида характерно образование плотных морщинистых колоний кремового цвета. Выросшую культуру микроскопируют и дифференцируют по ряду признаков. На среде с натрия салицилатом не растут М. tuberculosis и М. bovis, другие микобактерии дают пышный рост. Положительный ниациновый тест отличает М. tuberculosis от М. bovis.

Для определения других видов микобактерии изучают скорость их роста на яичных и агаровых средах, образование пигмента, рост при разных температурах и применяют различные биохимические тесты.

Приобретает большое значение количественная оценка обсемененности исследуемого материала, что позволяет оценить тяжесть процесса, его прогноз и выбор метода лечения. Она производится при сопоставлении данных бактериоскопического метода и выделения культуры микобактерии.

Для этого интенсивность роста микобактерии на питательных средах оценивают по 4-балльной системе: «+» — меньше 20 колоний, « + + » — 20 … 50 колоний, « + + + » — более 50 колоний, « + + + + » — сплошной рост.

При проведении обычного бактериологического исследования не удается выявление L-форм микобактерии туберкулеза, поэтому разработан специальный метод их выделения. Параллельно с высевом на яичные среды после предварительной обработки материала производят посев осадка в 3 … 5 пробирках с полужидкой агаровой смесью (на основе среды Школьниковой), содержащей 20 %  сахарозы,  10 %  сыворотки крупного рогатого скота и

100 ЕД/мл пенициллина или стрептомицина для подавления неспецифической микрофлоры. Через 1 … 2 мес приготавливают препараты с применением фазово-контрастной микроскопии, L-формы удается выделить почти в 20 % случаев.

При проведении бактериологического исследования частота получения культур микобактерии туберкулеза от больных детей во многом зависит от фазы туберкулезного процесса. Так, по данным некоторых авторов, в фазе распада у детей и подростков, больных туберкулезом легких, частота выделения микобактерии в доантибактериальном периоде составляла 46 … 68 %, в фазе инфильтрации — 13 … 16 % и в фазе рассасывания — 4 … 8 %.

Применение антибактериальной терапии
привело к снижению высеваемости микобактерии (14 против 46 %). У детей раннего возраста при активном туберкулезе частота обнаружения микобактерии составляет лишь 10 %. Несколько выше результаты при исследовании промывных вод бронхов. Отмечены значительная высеваемость от больных детей атипичных, пигментных микобактерии и увеличение их выделения в процессе лечения больных.

«Туберкулёз у детей и подростков», Е.Н. Янченко

В реакции определяется присутствие в сыворотке крови больных туберкулезом комплементсвязывающих антипротеиновых антител. В качестве антигена используется сухой туберкулин производственных серий, препарат взвешивают и разводят изотоническим раствором NaCl. Инактивированную сыворотку больного разводят от 1:2,5 до 1:160 в объеме 0,5 мл. В каждую пробирку добавляют по 0,5 мл туберкулина в разведении 1:10 и 0,5 мл комплемента (рабочую…

Схемы рентгенограмм органов грудной полости а — новорожденного; б — ребенка дошкольного возраста; в — взрослого; г — человека пожилого возраста с инволютивными изменениями. Обследование ребенка обычно начинается с общего осмотра, во время которого прежде всего следует оценить положение тела. В основном дети с первичными формами туберкулеза активны, их позы свободны. Однако при некоторых тяжелых…

Оценка градуированной скарификационной пробы осуществляется по Н. А. Шмелеву. Выделяют следующие варианты градуированной скарификационной пробы: неспецифическая реакция — небольшое покраснение на месте аппликации 100 % раствора туберкулина (чаще встречается при использовании АТК); средняя специфическая реакция (нормергическая) — умеренная чувствительность на большие концентрации туберкулина, отсутствие реакций на 1, подчас на 5 и даже на 25 %…

Изменение прозрачности легочных полей (просветление, затемнение) является наиболее важным признаком заболевания. Просветление является результатом патологического процесса, сопровождающегося увеличением воздухонаполнения всего легкого или части его. Ограниченные просветления могут иметь ободок, отделяющий их от смежных отделов легких, поэтому их называют кольцевидными. Они наблюдаются при опорожнившемся абсцессе, каверне, кисте, мешотчатых бронхоэктазах. При решении вопроса, какой именно патологический процесс…

При обследовании ребенка необходимо большое внимание уделять состоянию периферических лимфатических узлов, так как лимфатическая система вовлекается в процесс на самых ранних этапах развития туберкулезной инфекции. Увеличение периферических лимфатических узлов может являться одним из важных косвенных признаков туберкулезного процесса. У практически здорового, не инфицированного туберкулезом, ребенка удается пальпировать не более 4—5 групп периферических лимфатических узлов. Для…

Популярное
Новое Прочее